Правила забора назальных мазков и оральных жидкостей у свиней

ВЫБОР ЖИВОТНЫХ ДЛЯ ЗАБОРА ОБРАЗЦОВ ДЛЯ АНАЛИЗА

Зависит от цели:

• выявить инфекцию: выбирают свиней с клиническими признаками заболевания;
• подтвердить отрицательный статус стада по определенному заболеванию — образцы от животных, избранных наугад;
• определить статус инфекции в стаде во временном срезе - первые образцы забирают в первую день проявления симптомов заболевания и повторяют забор в тех же животных через определенный период, например 2-4 недели;
• определить статус инфекции в различных группах животных (перекрестное исследование) - забирают образцы у животных разного возраста, например 4-х, 8-и, 12-и, 16-и, 20-и и 24-недельного.

ПОДГОТОВКА К ЗАБОРУ ОБРАЗЦОВ

Назальные мазки

• Не следует забирать образцы у животных в больших группах, поскольку из-за паники свиньи могут травмировать друг друга или ветеринара во время манипуляций.
• Убедитесь, что животное хорошо зафиксировано.
• Зона, где находится животное во время забора образцов, хорошо освещена.
• Наденьте наушники или применяйте затычки для ушей.
• Используйте пластиковые палочки со стерильными тампонами. Диаметр и длина тампона должны соответствовать возрасту и массе свиньи.
• Не рекомендуются деревянные палочки, поскольку они могут поломаться, если животное будет дергаться, обороняясь.
• Тампон должен быть изготовлен из синтетического волокна (дакрон или вискоза), а не из хлопка, особенно если образцы будут исследовать методом ПЦР. Хлопок плохо «отдает» взятый мазком материал. Кроме того, деревянные палочки с тампонами из хлопка могут содержать вещества, которые инактивируют вирусы и замедляют тестирование методом ПЦР.
• Если образцы предназначены для бактериального посева, применяйте пластиковую пробирку с наполнителем (транспортной средой). Для ПЦР-теста — без среды.
• Если исследования будут проводить двумя методами, следует взять по два образца от животного, поместить в соответствующие пластиковые пробирки.
• Количество образцов, необходимых для анализа, может изменяться в зависимости от вида заболевания и уровня его распространения в стаде, точности выборки, метода исследования мазков и цели их забора (таблица 1, 2).
• Используйте новую чистую, небеленую хлопчатобумажную веревку диаметром в соответствии с размером и возрастом свиней (примерно 1 см для отъемышей, 2 см для свиней на доращивании-откорме). Не используйте веревки из синтетического материала, поскольку они не будут поглощать достаточное количество слюны для анализа.
• Длина веревки зависит от способа ее закрепления в отряде, но должна быть такой, чтобы свиньи смогли ее грызть.
• Одной веревки достаточно для забора образцов слюны от 10-15 свиней.
• Для каждого загона используйте отдельную веревку.
• Для каждой пробы оральной жидкости используйте стерильную пробирку для сбора клинического материала объемом 5-12 мл.
• В случае применения системы жидкого кормления, образцы следует забирать не раньше, чем через 2 часа после кормления, так как свиньи будут пассивные и не слишком интересоваться веревкой.
• Рекомендуемое минимальное количество образцов для анализа — 2 (чтобы свести к минимуму вероятность ошибочно негативного диагноза), но оно может меняться в зависимости от степени распространения заболевания в стаде, этиологии болезни, которую подозревают, метода анализа клинического материала и его точности.

Таблица 1

Количество образцов назальных мазков, необходимых для выявления заболевания в стаде

Источник: Dr. Heiko Nathues, Royal Veterinary College, 2018

Таблица 2

Рекомендуемое количество назальных мазков, необходимых для оценки уровня распространения заболевания

Источник: Dr. Heiko Nathues, Royal Veterinary College, 2018

ТЕХНИКА ЗАБОРА КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА

Назальные мазки

1. Поместите животное в отдельный станок или зажмите в угол отряда, ограничив его движение. Зафиксируйте рыло животного. Для этого можно применять специальный зажим. Обратите внимание на правильное его расположение — он должен находиться за первыми премолярами.
2. Очистите нос сухой бумажной салфеткой.
3. Глубоко просуньте тампон в носовую пазуху и оставьте на 3 секунды. Чтобы не травмировать животное, не стоит слишком давить на тампон.
4. Поверните тампон на треть вокруг центральной оси и оставьте еще на 3 секунды. Еще раз повторите.
5. Поместите тампон в пробирку.
6. Сразу же промаркируйте пробирку: например, укажите номер ушной бирки животного (идентификационный номер), используя водо- и спиртостойкий маркер.

Оральные жидкости

1. Разместите веревку так, чтобы свиньи в загоне могли легко ее достать (конец веревки должен находиться на уровне рыла), но не у кормушек или поилок. Если в загоне надо зафиксировать более одной веревки, развешайте их подальше друг от друга.
2. Оставьте веревку на 30 минут. Если свиньи малоактивны, веревку оставляют на 1 час.
3. Осторожно снимите веревку (она не должна касаться пола). Выжмите слюну с веревки. Для этого вставьте конец, который кусали свиньи, в чистый одноразовый пластиковый мешок. Сожмите веревку, чтобы оральные жидкости стекли.
4. Отрежьте один из углов пакета и слейте слюну в пластиковую пробирку. Для анализа необходимо забрать минимум 2 мл жидкости.
5. Если в образце много грязи, частиц корма или иного материала, жидкость следует центрифугировать при 2000 x g в течение 10-и минут.
6. Сразу же промаркируйте пробирку: номер ушной бирки животного или иным образом идентифицируйте, от которой свиньи взят образец, используя водо- и спиртостойкий маркер.

Хранение образцов

Образцы следует хранить в холодильнике до момента их передачи в лабораторию, но не дольше 24-36 часов после забора. Если невозможно своевременно доставить образцы, которые будут исследоваться методом ПЦР, их замораживают при температуре -20-80 °С. Размораживают непосредственно перед проведением исследования. Материал не пригоден для бактериального посева после замораживания.

За материалами работы Др. Хейко Натха, Королевский ветеринарный колледж (Великобритания)

PigUA.info по материалам журнала Прибыльное свиноводство №1 (49), февраль 2019р.